Antwoord:
Dit is typisch een antilichaamspecificiteitstest.
Uitleg:
In een ELISA is het erg moeilijk om te bepalen of uw antilichaam al dan niet aan uw eiwit van belang, een heel ander eiwit of een reeks eiwitten bindt.
De Western-blot zal worden gebruikt om de specificiteit van het antilichaam te controleren (u zou moeten opmerken dat de Western-blot mogelijk niet alle kruisreacties met incorrecte eiwitten detecteert).
In de Western-blot zie je de grootte van het eiwit waaraan het antilichaam bindt (dat kan niet in een ELISA). Daarom, bijvoorbeeld, als uw antilichaam zou moeten binden aan een eiwit van 56 kDa en u ziet een band op ~ 56 kDa op de blot, dan kunt u er redelijk zeker van zijn dat het antilichaam aan het juiste eiwit bindt.
Als u aan de andere kant een band van 32 kDa zag, kon u concluderen dat het antilichaam aan het verkeerde eiwit bindt. Evenzo, als er veel banden opdoken op de Western-blot, zou dat (in de afwezigheid van eiwitafbraak) suggereren dat het antilichaam aan een reeks verschillende eiwitten bindt.
In het voorbeeld van de 32 kDa-band die op de gel verschijnt, en ook de meerdere banden, zou het suggereren dat het antilichaam specificiteit voor de ELISA mist en dat alle resultaten die in de ELISA worden gezien mogelijk niet specifiek zijn voor het eiwit van interesse.
Als ik dit soort tests heb uitgevoerd, kan ik een soort van "storend" reagens gebruiken om het antilichaam te testen. Als ik bijvoorbeeld mijn antilichaam tegen een peptide heb opgewekt, kan ik het peptide in de primaire antilichaamoplossing opnemen om te testen op correcte binding. Dat wil zeggen, in de aanwezigheid van het peptide zou ik geen band of geen resultaat van de ELISA zien omdat mijn primaire antilichaam niet in staat zou zijn te binden vanwege de aanwezigheid van een overmaat van het peptide.
Waarom GAPDH wordt gebruikt in Western Blot? + Voorbeeld
GAPDH wordt vaak gebruikt als laadcontrole. Bij Western-blotting gebruiken we vaak GAPDH als laadcontrole. Wat dit betekent is dat door te onderzoeken op GAPDH we kunnen controleren of we een geladen equivalente hoeveelheid eiwitten op verschillende rijstroken van de blot hebben. Een voorbeeld van gebruik - stel dat we een ziekte hebben waarvan we denken dat ze een verhoging van een bepaald eiwit in de cel veroorzaakt. We zouden een monster maken van "gezonde" cellen en een ander monster van "zieke" cellen. We zouden dan equivalente eiwithoeveelheden van beide monsters op een gel laden voor de Western-b
Waarom wordt formele heffing gebruikt? + Voorbeeld
Omdat het ons een idee geeft van elektronische structuur. Formele lading is natuurlijk een formalisme. Dat wil zeggen dat het geen echt bestaan heeft, maar het concept kan nuttig zijn om structuur en binding te begrijpen. We worden al heel vroeg geïntroduceerd met het idee dat "covalente binding" het gevolg is van het delen van elektronen en "ionische binding" van de overdracht van elektronen. Dus het neutrale molecuul methaan, CH_4, heeft geen ladingsscheiding en de ionensoort NaCl kan worden voorgesteld als Na ^ (+) Cl ^ (-). Om methaan als voorbeeld te behouden, heeft het methaanmolecuul in tot
Waarom wordt genetisch gemodificeerd voedsel gebruikt? + Voorbeeld
Veel redenen - voornamelijk om ons allemaal te voeden. Genetisch gemodificeerd voedsel valt onder de tak van GGO's - genetisch gemodificeerde organismen. Er zijn veel voordelen, maar potentiële gevaren door het consumeren van GGO's - om deze redenen gebruiken we ze. Ik zal de belangrijkste bespreken. Als u naar uw supermarkt gaat en voedsel koopt van het gedeelte met vers fruit, is 90% + van het voedsel genetisch gemodificeerd. Dit komt omdat de menselijke bevolking groeit en we meer voedsel nodig hebben om ons allemaal te voeden. Aldus maakt een werkwijze om het DNA van het voedsel te modificeren grotere vruc