Antwoord:
GAPDH wordt vaak gebruikt als laadcontrole.
Uitleg:
Bij Western-blotting gebruiken we GAPDH vaak als laadcontrole. Wat dit betekent is dat door te onderzoeken op GAPDH we kunnen controleren of we een geladen equivalente hoeveelheid eiwitten op verschillende rijstroken van de blot hebben.
Een voorbeeld van gebruik - stel dat we een ziekte hebben waarvan we denken dat ze een verhoging van een bepaald eiwit in de cel veroorzaakt. We zouden een monster maken van "gezonde" cellen en een ander monster van "zieke" cellen. We zouden dan equivalente eiwithoeveelheden van beide monsters op een gel laden voor de Western-blot.
Na het onderzoeken van de vlek op ons eiwit van belang, vinden we dat in de zieke cellen het eiwitniveau inderdaad verhoogd is (dat wil zeggen dat een donkerdere band op de blot wordt geproduceerd). Om aan te tonen dat deze toename van het eiwit het gevolg is van een verandering van expressie in de cel, in plaats van een belastend artefact (dat wil zeggen dat de meer instabiele band wordt veroorzaakt door een verandering in eiwitexpressie in de cellen en niet door per ongeluk meer te laden) van het "ziekte" -monster dan het "gezonde") zouden we ook de blot voor GAPDH onderzoeken om aan te tonen dat de totale eiwitniveaus in beide lanen hetzelfde zijn.
Door dit te doen laten we zien dat equivalent eiwit in de twee rijstroken is geladen en dat de verandering in de bandintensiteit die we waarnemen het gevolg is van veranderingen in eiwitexpressie voor het eiwit van belang.
Waarom wordt formele heffing gebruikt? + Voorbeeld
Omdat het ons een idee geeft van elektronische structuur. Formele lading is natuurlijk een formalisme. Dat wil zeggen dat het geen echt bestaan heeft, maar het concept kan nuttig zijn om structuur en binding te begrijpen. We worden al heel vroeg geïntroduceerd met het idee dat "covalente binding" het gevolg is van het delen van elektronen en "ionische binding" van de overdracht van elektronen. Dus het neutrale molecuul methaan, CH_4, heeft geen ladingsscheiding en de ionensoort NaCl kan worden voorgesteld als Na ^ (+) Cl ^ (-). Om methaan als voorbeeld te behouden, heeft het methaanmolecuul in tot
Waarom wordt genetisch gemodificeerd voedsel gebruikt? + Voorbeeld
Veel redenen - voornamelijk om ons allemaal te voeden. Genetisch gemodificeerd voedsel valt onder de tak van GGO's - genetisch gemodificeerde organismen. Er zijn veel voordelen, maar potentiële gevaren door het consumeren van GGO's - om deze redenen gebruiken we ze. Ik zal de belangrijkste bespreken. Als u naar uw supermarkt gaat en voedsel koopt van het gedeelte met vers fruit, is 90% + van het voedsel genetisch gemodificeerd. Dit komt omdat de menselijke bevolking groeit en we meer voedsel nodig hebben om ons allemaal te voeden. Aldus maakt een werkwijze om het DNA van het voedsel te modificeren grotere vruc
Waarom wordt western blot gebruikt om elisa te bevestigen? + Voorbeeld
Dit is typisch een antilichaamspecificiteitstest. In een ELISA is het erg moeilijk om te bepalen of uw antilichaam al dan niet aan uw eiwit van belang, een heel ander eiwit of een reeks eiwitten bindt. De Western-blot zal worden gebruikt om de specificiteit van het antilichaam te controleren (u zou moeten opmerken dat de Western-blot mogelijk niet alle kruisreacties met incorrecte eiwitten detecteert). In de Western-blot zie je de grootte van het eiwit waaraan het antilichaam bindt (dat kan niet in een ELISA). Daarom, bijvoorbeeld, als uw antilichaam zou moeten binden aan een eiwit van 56 kDa en u ziet een band op ~ 56 kDa