Waarom is het essentieel dat hetzelfde restrictie-enzym wordt gebruikt voor het splitsen (knippen) van het DNA van beide organismen die worden gebruikt om een transgeen organisme te creëren?

Waarom is het essentieel dat hetzelfde restrictie-enzym wordt gebruikt voor het splitsen (knippen) van het DNA van beide organismen die worden gebruikt om een transgeen organisme te creëren?
Anonim

Antwoord:

Zie hieronder…

Uitleg:

Restrictie-enzymen worden bij specifieke sequenties geknipt, dus hetzelfde restrictie-enzym moet worden gebruikt omdat het fragmenten met dezelfde complementaire kleverige uiteinden zal produceren, waardoor het mogelijk wordt dat er zich daartussen bindingen vormen.

Er zijn bepaalde compatibele restrictiesites die samen kunnen worden gebruikt. Xho1 en Sal1 zijn voorbeelden. Hun kleverige uiteinden komen overeen, en dus kunnen ze samen worden geligeerd. Maar ligatie doodt zowel de Xho1- als de Sal1-site, dus je kunt geen van beide gebruiken om opnieuw te knippen (op de ligatielocaties).

U kunt ook exonuclease of PCR gebruiken om de meeste plakkerige uiteinden te maken (5 of 3 overhangen) in stompe sites - op deze manier kun je ligeren in een botte knipsite - maar dit zal over het algemeen ook de botte site doden.