Antwoord:
Veel…
Uitleg:
Er zijn veel redenen waarom bands mogelijk niet op een western blot verschijnen. Zijn de monster- en antilichaamcombinaties in het verleden goed gewerkt?
Hieronder staan slechts enkele die ik op dit moment kan bedenken waardoor bands mogelijk niet verschijnen:
-
Is het eiwit uit de gel overgebracht? Probeer het membraan te kleuren met iets als ponceau S of amido black om te zien of de banden aanwezig zijn. Soms kun je de eiwitbanden op het membraan zien door het te bevochtigen en het onder een hoek met het licht te houden.
-
Werkt het primaire antilichaam? Dit is moeilijk om te testen en de enige manier om dit te doen is door een positieve controle toe te voegen waarvan je weet dat je het eiwit van belang aanwezig hebt. Als u een deel van het interessante eiwit heeft, kunt u proberen het op het Western-blotmembraan te vinden (dat wil zeggen, u voert de gel niet uit) en te kijken of u een resultaat krijgt als u het membraan verwerkt alsof het een Western-vlek is.
-
Is het secundaire antilichaam het primaire antilichaam? Nogmaals, een moeilijke test. Over de enige test die u kunt doen, is de puntentest hierboven vermeld in 2.
-
Werkt het "detectiesysteem"? Afhankelijk van de detectiemethode die u gebruikt, kunt u proberen een deel van het secundaire antilichaam aan te wijzen om te zien of de detectieoplossing en ook het activerende middel / enzym op het secundaire antilichaam werkt. Dat wil zeggen, kunt u de reactie activeren met alleen het secundaire antilichaam?
Ten slotte kan het zo eenvoudig zijn als een van de oplossingen die worden gebruikt tijdens het onderzoeken van de plot verkeerd wordt opgemaakt. Als de zoutconcentratie bijvoorbeeld verkeerd is in de buffer, kan dit ertoe leiden dat de antilichamen uit de blot worden vrijgegeven. Hetzelfde zou ook gebeuren als de pH van de buffers onjuist was.
De "raarste" oorzaak voor een westerse vlek die niet werkte, die ik persoonlijk heb ervaren, was toen we de leverancier van het melkpoeder veranderden dat we gebruikten om het membraan te blokkeren. Het poeder van de nieuwe leverancier bevatte een fosfotyrosinefosfatase dat alle fosfaatgroepen verwijderde die we probeerden te detecteren met ons anti-fosfotyrosine-antilichaam.
Is nul denkbeeldig of niet? Ik denk dat het komt omdat 0 = 0i waar ik iota is. Als het denkbeeldig is, waarom is elk venn-diagram van echte en imaginaire getallen op internet niet-verbonden. Het moet echter overlappend zijn.
Nul is een reëel getal omdat het bestaat in het echte vlak, dat wil zeggen, de reële getallenlijn. 8 Uw definitie van een denkbeeldig nummer is onjuist. Een imaginair getal is van de vorm ai waar a = 0 Een complex getal heeft de vorm a + bi waarbij a, b in RR. Daarom zijn alle reële getallen ook complex. Ook wordt een getal waarin a = 0 gezegd zuiver imaginair te zijn. Een reëel getal, zoals hierboven vermeld, is een getal dat geen denkbeeldige delen bevat. Dit betekent dat de coëfficiënt van i 0 is. Ook is iota een adjectief dat een kleine hoeveelheid betekent. We gebruiken het niet om de ima
Joe speelt een spel met een gewone dobbelsteen. Als het aantal zelfs opduikt, krijgt hij 5 keer het nummer dat opkomt. Als het vreemd is, verliest hij 10 keer het aantal dat opkomt. Hij gooit een 3. Wat is het resultaat als een geheel getal?
-30 Zoals het probleem aangeeft, verliest Joe 10 keer het oneven aantal (3) dat opkomt. -10 * 3 = -30
Waarom klopt het bloed niet in de bloedvaten? Bloed bevat bloedplaatjescellen die helpen bij het stollen van bloed wanneer er een snee in ons lichaam is. Waarom stolt het niet als er bloed aanwezig is in het bloedvat in een normaal gezond lichaam?
Bloed stolt niet in de bloedvaten vanwege een chemische stof die heparine wordt genoemd. Heparine is een anticoagulans waardoor het bloed niet in de bloedvaten kan stollen