Waarom worden restrictie-enzymen bewaard in 50% glyceroloplossing?

Waarom worden restrictie-enzymen bewaard in 50% glyceroloplossing?
Anonim

Antwoord:

Om ze intact te houden …

Uitleg:

Beperkingen Enzymen worden gebruikt in ZEER kleine hoeveelheden, maar worden meestal gekocht in iets grotere partijen.

Als u niets anders wilt, geeft u meestal de voorkeur aan verschillende tests met dezelfde batch. De gekochte batch moet daarom voor een langere tijd worden opgeslagen.

De meeste enzymen zijn een tijdje perfect gelukkig in hun buffer bij 4 graden Celsius, maar zullen uiteindelijk degraderen. 24 uur is meestal de geaccepteerde limiet.

Voor opslag op langere termijn moet de batch worden bevroren. -20C is de standaard en zal deze een aantal maanden bewaren. Voor zelfs langere perioden (bijvoorbeeld een of meer jaren) is -70C de norm.

Het is noodzakelijk om het snel te bevriezen, en in kleine containers (bijvoorbeeld Eppendorfs) om te vaak ontdooien / opnieuw invriezen te voorkomen.

Om schade aan het eiwit bij dergelijke lage temperaturen te voorkomen, kunnen stabilisatoren worden toegevoegd, zoals DTT (Di-Thio-Treitol), Serum Albumine en, het belangrijkst, Glycerol (5-50%)

Vreemd genoeg is het bij -20C nodig om 50% Glycerol te gebruiken, terwijl bij -70 Glycerol niet echt nodig is, hoewel toevoeging ervan kan helpen het proteïne te stabiliseren ….