Hoe isoleren wetenschappers DNA om het te bestuderen?

Antwoord:

Er zijn een paar stappen om dit te doen, negeer alstublieft mijn slechte Engels, ik hoop dat je het proces nog steeds kunt begrijpen.

Uitleg:

Dit is niet zo moeilijk als je zou denken.

Laten we zeggen dat we DNA willen isoleren uit een kalfthymus, je moet deze instructies volgen (ze zijn voor een appel zo ver als ik weet, maar er zijn kleine variaties):

1. Neem 3 stukjes van 3 gram en snijd het in kleine stukjes, zo klein als mogelijk.

2. Doe het in een blender, met 75 ml zoutoplossing-citraat (SSC) per stuk en zorg ervoor dat het blad van de blender volledig bedekt is met SSC, dus voeg een stukje thymus toe als dat nodig is.

   SSC zorgt ervoor dat de celmembranen worden opgelost.

   Blijf blenden tot alles glad is.

3. Doe het in een buis voor de centrifuge en tarreer het met een andere buis zodat de centrifuge niet breekt

4. Plaats de buis 20 minuten in de centrifuge bij 5000 tpm

5. Wanneer u de buizen uit de centrifuge haalt, ziet u twee componenten vastzitten. De bodem heeft een vaste stof, dit wordt de pellet genoemd en dit houdt de celkernen vast met het DNA. Je zult ook een vloeibare substantie zien, die de supernatant wordt genoemd en deze bestaat uit de SSC met de opgeloste celmembranen.

6. Giet het supernatant weg in één vloeiende beweging, dit wordt decanteren genoemd en dit laat je met de pellet achter.

7. Doe een kleine hoeveelheid 2,2 M NaCl in de buis met de pellet, zodat de pellet net bedekt is met NaCl. NaCl zorgt ervoor dat de eiwitten die het DNA omringen precipiteren.

8. Roer het met een lege reageerbuis of roerstaafje. Uiteindelijk zou je twee componenten moeten krijgen. De eiwitten op de bodem en daarboven een stroperige vloeistof.

9. Neem de visceuze vloeistof af met een pipet en zorg ervoor dat je geen eiwitten neemt met de viskeuze vloeistof. (heel kleine stukjes eiwit zijn erg moeilijk te vermijden, maar probeer zoveel mogelijk eiwitten te vermijden)

10. Doe de viskeuze vloeistof die u in een beker hebt gepipetteerd en voeg er 2x zoveel ethanol aan toe. Maar voeg de ethanol voorzichtig toe, want je wilt het niet mengen met het DNA. Op het raakvlak tussen de ethanol en de viskeuze vloeistof zou je DNA-bellen moeten zien opkomen.

11. Roer voorzichtig met een glazen staaf, het DNA is negatief geladen, zodat het aan de staaf moet blijven kleven.

12. Doe het in een reageerbuisje en los het op met SSC.

Een speciale machine kan je dan vertellen hoeveel DNA je hebt geïsoleerd en hoe zuiver het is.